Hypoxia increases susceptibility of Pacific white shrimp to whitespot syndrome virus (WSSV) / Condição de hipóxia aumenta a susceptibilidade do camarão branco do Pacíficoao vírus da mancha branca (WSSV)

The present study aimed to evaluate the mortality, reactive oxygen species production (ROS) and total hemocyte counts (THC) of the marine shrimp Litopenaeus vannamei infected with the white spot syndrome virus (WSSV) at three levels of oxygen saturation. For this, 360 shrimp (20±2g) were distributed in 24 tanks (60L), divided in two groups (infected and non-infected), which were subjected to 30, 60 and 100% of dissolved oxygen saturation (in quadruplicate). During 96 hours after infection, daily hemolymph samples were collected for hemato-immunological parameter evaluation (THC and ROS) and dead animals were removed and computed to assess cumulative mortality rates. In the infected group, animals subjected to 100% saturation showed higher ROS production (P<0.05) after 48 hours, while THC was significantly reduced (P<0.05), regardless of oxygen saturation. The hypoxia resulted in high mortality when compared to 100% saturation condition. In the uninfected group, no significant differences were observed in all evaluated parameters. Thus, the hypoxia condition increased the susceptibility of shrimp to the infection of WSSV, which may be partly related to the low ROS production showed by the animals subjected to 30% oxygen saturation.

O presente estudo teve por finalidade avaliar a mortalidade e a contagem total de hemócitos (CTH) e espécies reativas de oxigênio (EROs) de camarão Litopenaeus vannamei infectados com o vírus da mancha branca (WSSV) e submetidos a três níveis de saturação de oxigênio. Para tanto, 360 camarões (20±2g) foram distribuídos em 24 tanques (60L), divididos em dois grupos, infectados e não infectados e submetidos a 30, 60 e 100% de saturação de oxigênio (em quadruplicata). Após a infecção, diariamente foram coletadas amostras de hemolinfa dos animais para avaliação dos parâmetros hematoimunológicos (CTH e EROs) e foi estimada a mortalidade, por 96 horas. No grupo com infecção, os animais submetidos à saturação de 100% apresentaram um aumento na produção de EROs (P<0,05) após 48 horas, ao mesmo tempo em que a CTH demonstrou uma redução (P<0,05) independentemente da saturação do oxigênio, e a condição de hipóxia acarretou maiores mortalidades quando comparada à do grupo com 100% de saturação. No grupo sem infecção, não foram observadas diferenças significativas nos parâmetros avaliados nem mortalidade. Dessa forma, pode-se concluir que a hipóxia aumentou a susceptibilidade do camarão à infecção com o vírus da mancha branca, que pode estar, em parte, relacionada com a baixa contagem de hemócitos e produção de EROs observadas nos animais submetidos a essa condição.

Effect of probiotic supplemented diet on marine shrimp survival after challenge with vibrio harveyi / Efeito do uso de dieta suplementada com o probiótico sobre a sobrevivência de camarões marinhos após o desafio com vibrio harveyi

The effect of a Lactobacillus plantarum-supplemented diet on shrimp growth, digestive tract bacterial microbiota, survival, and some hemato-immunological parameters after an experimental challenge with Vibrio harveyi was studied. No difference (P>0.05) was observed in shrimp survival (80±6 percent) and final weight (6.63±0.56g) after 60 days feeding trial. Total bacteria count and Vibrio spp. count in the digestive tract were not diferent (P>0.05) until day 40, but they were lower (P<0.05) in the probiotic-supplemented group on day 60. Total lactic bacteria in the shrimp digestive tract was higher after day 20 in the probiotic-supplemented group. Ten hours after V. harveyi challenge, survival of the probiotic-supplemented group (65.7±2.9 percent) was higher (P>0.05) than the control group (39.9±4.4 percent). Bacterial counts in hemolymph and hepatopancreas was lower (P<0.05) in the probiotic-supplemented group than in the control group after V. harveyi challenge. Total hemocyte count and serum agglutination activity were higher (P>0.05) in the probiotic-supplemented group after challenge with V. harveyi. Probiotic-supplemented diet modifies shrimp digestive tract bacterial microbiota, increasing resistance to V. harveyi infection.

Avaliou-se o efeito de uma dieta suplementada com Lactobacillus plantarum na engorda de Litopenaeus vannamei sobre a microbiota bacteriana do trato digestivo, a sobrevivência e alguns parâmetros hematoimunológicos após desafio com Vibrio harveyi. Não foi observada diferença significativa na sobrevivência (80±6 por cento) e no peso final dos camarões (6,63±0,56g) durante a engorda (60 dias). A população de bactérias totais e Vibrio spp. no intestino não diferiu até o 40º dia de cultivo, mas foi inferior nos camarões alimentados com dieta suplementada com probiótico no 60º dia de cultivo. A população de bactérias lácticas foi superior no intestino de camarões alimentados com dieta suplementada com probióticos após o 20º dia de cultivo. Dez horas após o desafio, a sobrevivência dos camarões alimentados com dieta suplementada com probiótico foi superior (65,7±2,9 por cento) a dos camarões do controle (39,9±4,4 por cento). Camarões alimentados com dieta suplementada com probióticos e desafiados com V. harveyi apresentaram menor contagem de bactérias na hemolinfa e hepatopâncreas. A contagem total de hemócitos e a atividade aglutinante da hemolinfa foram superiores nos camarões inoculados com V. harveyi alimentados com dieta suplementada com probióticos. A suplementação da dieta com probióticos modifica a microbiota bacteriana intestinal dos camarões aumentando sua resistência ao desafio com V. harveyi.

Characterization and experimental infection of Flexibacter maritimus (Wakabayashi et al. 1986) in hatcheries of post-larvae of Litopenaeus vannamei Boone, 1931.

A preliminary study to characterize filamentous bacteria, whose presence is related to high mortality of Litopenaeus vannamei larvae cultured in Santa Catarina State, Brazil, is reported. The extract of infected larvae was diluted in different concentrations, cultured in marine agar (Difco, Marine Agar 2216) and incubated at 30 degrees C for 48 hours. The biochemical characterization included hydrolytic reactions of starch, gelatin and tyrosine, growth in TCBS agar, growth in 0 and 37 per thousand salinity, pigment production in tyrosine agar, production of H2S, nitrate reduction, congo red reaction, oxidase and catalase. The isolated bacteria belong to the species Flexibacter maritimus, Gram-negative bacilli of 0.4-0.5 microm width and 15 microm length. Experiments were carried out on pathogenicity of F. maritimus in post-larvae of L. vannamei. Survival and symptoms in L. vannamei post-larvae 24 hours after inoculation with F. maritimus and its growth in marine agar were evaluated. Mortality was detected around 92,5% as well as symptoms like melanized lesions in several parts of body, discolouration of gills, bad formation of appendages and of the last abdominal segment, low motility and feeding reduction. The experimental infection results suggested that isolated bacteria of the genus Flexibacter are pathogenic to the shrimp Litopenaeus vannamei post-larvae.

Characterization and experimental infection of Flexibacter maritimus (Wakabayashi et al. 1986) in hatcheries of post-larvae of Litopenaeus vannamei Boone, 1931

A preliminary study to characterize filamentous bacteria, whose presence is related to high mortality of Litopenaeus vannamei larvae cultured in Santa Catarina State, Brazil, is reported. The extract of infected larvae was diluted in different concentrations, cultured in marine agar (DifcoTM, Marine Agar 2216) and incubated at 30 °C for 48 hours. The biochemical characterization included hydrolytic reactions of starch, gelatin and tyrosine, growth in TCBS agar, growth in 0 and 37‰ salinity, pigment production in tyrosine agar, production of H2S, nitrate reduction, congo red reaction, oxidase and catalase. The isolated bacteria belong to the species Flexibacter maritimus, Gram-negative bacilli of 0.4-0.5 µm width and 15 µm length. Experiments were carried out on pathogenicity of F. maritimus in post-larvae of L. vannamei. Survival and symptoms in L. vannamei post-larvae 24 hours after inoculation with F. maritimus and its growth in marine agar were evaluated. Mortality was detected around 92,5 percent as well as symptoms like melanized lesions in several parts of body, discolouration of gills, bad formation of appendages and of the last abdominal segment, low motility and feeding reduction. The experimental infection results suggested that isolated bacteria of the genus Flexibacter are pathogenic to the shrimp Litopenaeus vannamei post-larvae.

Neste trabalho, relata-se um estudo preliminar para caracterizar bactérias filamentosas associadas a elevadas mortalidades de larvas e pós-larvas cultivadas no Estado de Santa Catarina, Brasil. Um extrato de larvas infectadas foi diluído em diferentes concentrações, cultivado em Agar Marine (DifcoTM, Marine Agar 2216) e incubado a 30° C por 48 horas. A caracterização bioquímica inclui reações de amido, gelatina e tirosesine, crescimento em Agar TCBS,crescimento a 0 e 37‰ de salinidade, produção de pigmentos em Agar Tirosine, produção de H2S, redução de nitrato, reação vermelho congo, oxidase e catalase. A bactéria isolada apresentou características de Flexibacter maritimus, um bacilo Gram negativo de 0,4-0,5 µm de largura e 15 µm de comprimento. Os experimentos foram realizados sobre a patogenicidade de F. Maritimus, em pós-larvas de L. vannamei. Foram avaliados a sobrevivência e os sintomas das pós-larvas 24 horas após a inoculação com F. Maritimus, além do seu crescimento em Agar Marine. Foram encontradas mortalidades de 92,5 por cento e sintomas próprios da enfermidade, tais como lesões melanizadas em várias partes do corpo, descoloração das brânquias e diminuição da motilidade e da alimentação. Com base nos resultados da infecção experimental, pode se concluir que a bactéria isolada do gênero Flexibacter é patogênica para pós-larvas de L. vannamei.